血清沉淀會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染嗎？一般情況下，正常的沉淀物不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染。但多數(shù)情況下，血清沉淀會(huì)對(duì)我們判斷細(xì)胞是否出現(xiàn)污染造成困擾。絮狀沉淀容易和真菌、細(xì)菌混淆；磷酸鈣沉淀引起的小黑點(diǎn)容易與支原體污染混淆。

細(xì)胞培養(yǎng)中血清沉淀從何而來？

剛出廠的血清，應(yīng)該是澄清透明的，為了保證品質(zhì)，血清會(huì)儲(chǔ)存在-20℃的環(huán)境中。如果運(yùn)輸過程中，出現(xiàn)了溫度忽高忽低，反復(fù)凍融的情況，就容易析出大量沉淀。另外，不正確的解凍方法也會(huì)引起血清產(chǎn)生大量沉淀。

細(xì)胞培養(yǎng)中如何減少血清沉淀？

1、正確的運(yùn)輸溫度：運(yùn)輸過程中，要嚴(yán)格-20℃低溫，避免反復(fù)凍融。

2、使用正確的融化方法：在使用時(shí)，正確的解凍方法也很重要，這里推薦使用國(guó)際上通用的“三步法"解凍。

需要注意的是，如果血清是儲(chǔ)存在-80℃冰箱中，正式解凍前應(yīng)先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中過渡。

一次解凍后，分裝至無菌離心管中，盡量保證每管是一次的用量，分裝管解凍也遵循三步法，解凍后需全部用完。

3、使用正確的儲(chǔ)存方式：長(zhǎng)期儲(chǔ)存在 2-8℃或在室溫下放置時(shí)間過長(zhǎng)，都會(huì)引起沉淀，建議配制好的培養(yǎng)基在4℃冰箱中存放不要超過7天，血清分裝好后-20℃儲(chǔ)存。

4、特殊的處理：γ射線照射與熱滅活也容易引起沉淀析出，因此要注意射線照射劑量以及熱滅活方法（40℃水浴加熱20分鐘即可）。

細(xì)胞培養(yǎng)中如何去除沉淀？

如果要除去血清中的沉淀，可以將血清分裝至無菌離心管中，大約400g 離心，留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞，因此不建議用過濾的方法。

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